细胞简介：

       肝脏是人体各种物质代谢的重要场所, 该器官主要由肝细胞(hepatic cells, HC)、肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells, LSEC)、肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSC)和枯否细胞(Kupffer cells, KC)等细胞构成, LSEC作为肝脏中非实质细胞的重要组成部分,肝窦内皮细胞在调节肝窦血流与周围组织的物质交换中起有效的中枢性的作用，因此肝窦内皮细胞对于维持正常的肝功能起十分重要的作用。同时肝窦内皮细胞在肝脏的生理病理过程中发挥着诸多的重要功能。

       本公司生产的大鼠肝窦内皮细胞采用体外多步灌注和密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×105/T25方瓶，Stabilin-2呈阳性，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

实验操作：

       收到细胞后，取出 25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，放入 37℃，5%CO2细胞培养箱中静置 4-6 小时或过夜， 以稳定细胞状态，然后用 75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，换用新鲜完全培养液进行后续实验。      

       上皮细胞增殖能力有限，不建议传代，如果想要传代铺板，需要按照下面步骤操作： 1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%及以上面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞 一次； 2）添加 0.125%胰蛋白酶消化液 2ml 至培养瓶中，37℃培养箱中孵育 2-3min 左右，倒置显微镜下 观察细胞消化情况，若细胞回缩变圆、透亮、轻拍瓶壁呈流沙样脱落，则快速加入完全培养液终止消 化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1500rpm/min，离心 5min； 3）弃上清，沉淀细胞用 12ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代或者直接按照适当 的比例铺板即可，最后放入 37℃，5%CO2 细胞培养箱中培养； 4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或实验。

注意事项：

       1、培养基于 4℃条件下可保存 3-6 个月； 2、 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作； 3、 原代培养的细胞，不建议多次传代后进行实验。 4、 该细胞只可用于科研；